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Título: Agreement between PCR and conventional methods for diagnosis of bovine tuberculosis
Concordancia de la PCR y métodos rutinarios para el diagnóstico de tuberculosis bovina
Autores: 
Palabras clave: POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) POST MORTEM INSPECTION (PI); HISTOPATHOLOGY; BOVINE TUBERCULOSIS (TB); MYCOBACTERIUM BOVIS
REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR); INSPECCIÓN POST MORTEM (IP); HISTOPATOLOGÍA; TUBERCULOSIS BOVINA (TB); MYCOBACTERIUM BOVIS
Fecha de publicación: 14-Sep-2011
Editorial: Facultad de Medicina Veterinaria y Zootecnia
Descripción: DIAGNOSIS OF BOVINE TUBERCULOSIS (TB) WAS ANALYZED USING POLYMERASE CHAIN REACTION (PCR) IN 2 GROUPS OF ANIMALS: THE FIRST FORMED BY 21 TUBERCULIN REACTING CATTLE FROM A TB ENDEMIC ZONE, AND THE SECOND BY 20 TUBERCULIN NEGATIVE CATTLE FROM A TB-FREE ZONE. ALL 41 ANIMALS WERE SACRIFICED AND POST MORTEM INSPECTION, HISTOPATHOLOGY AND MYCOBACTERIUM BOVIS CULTURE WERE PERFORMED. IN THE FIRST GROUP, TUBERCULOUSLIKE LESIONS WERE FOUND IN ALL 21 CASES BY HISTOPATHOLOGY (HEMATOXYLIN-EOSIN), 15 OF THEM HAD COMPATIBLE LESIONS (ZIEHL-NEELSEN POSITIVES) AND M. BOVIS WAS CULTURED ONLY IN 11. LESIONS WERE NOT FOUND IN ANY OF THE ANIMALS FROM THE SECOND GROUP. HISTOPATHOLOGY SHOWED GOOD CONCORDANCE WITH CULTURE, BOTH FOR TUBERCULOSIS-LIKE LESIONS (COHEN´S KAPPA VALUE, K = 0.52) AS WELL AS FOR COMPATIBLE LESIONS (K = 0.44). DNA WAS OBTAINED FROM LYMPHATIC NODES ASSOCIATED TO THE RESPIRATORY TRACT IN ALL 41 CASES. A SIMPLE PCR DIRECTED TOWARDS THE GENE OF THE MPB70 PROTEIN WAS IMPLEMENTED AND A NEW NESTED PCR WAS DEVELOPED. THE NESTED PCR DETECTED AS POSITIVES THE 21 CASES WITH TUBERCULOUS-LIKE LESIONS (100%). BOTH PCR METHODS SHOWED GOOD CONCORDANCE WITH HISTOPATHOLOGY (K = 0.44-0.71), BUT IN THE CASE OF M. BOVIS CULTURE THIS CONCORDANCE WAS OBSERVED ONLY WITH NESTED PCR (K = 0.52). CONSIDERING THE COMPATIBLE LESIONS (ZN) AS A CONFIRMATIVE DIAGNOSIS, BOTH CULTURE AND SIMPLE PCR SHOWED 53% OF SENSITIVITY AND 88% OF SPECIFICITY, WHILE THE NESTED PCR SHOWED 100% OF SENSITIVITY AND 77% OF SPECIFICITY. THE NESTED PCR CAN ALLOW THE CONFIRMATION OF TB DIAGNOSIS IN 24 HOURS.
SE ANALIZÓ EL DIAGNÓSTICO DE TUBERCULOSIS BOVINA (TB) USANDO LA REACCIÓN EN CADENA DE LA POLIMERASA (PCR) EN DOS GRUPOS DE ANIMALES: EL PRIMERO DE ELLOS CONSTITUIDO POR 21 BOVINOS REACTORES A LA TUBERCULINA DE UNA ZONA ENDÉMICA DE TB Y EL SEGUNDO DE 20 ANIMALES NEGATIVOS A LA TUBERCULINA, DE UNA ZONA LIBRE. LOS 41 ANIMALES SE SACRIFICARON Y SE REALIZÓ INSPECCIÓN POST MORTEM, HISTOPATOLOGÍA Y CULTIVO DE MYCOBACTERIUM BOVIS. EN EL PRIMER GRUPO, A LA HISTOPATOLOGÍA SE IDENTIFICARON LESIONES SUGESTIVAS DE TB (HEMATOXILINA-EOSINA) EN LOS 21 CASOS, 15 DE ELLOS TENÍAN LESIONES COMPATIBLES (ZIEHL-NEELSEN POSITIVAS) Y SÓLO EN 11 SE AISLÓ M. BOVIS. NO SE ENCONTRARON LESIONES EN NINGUNO DE LOS ANIMALES DEL SEGUNDO GRUPO. LA HISTOPATOLOGÍA MOSTRÓ BUENA CONCORDANCIA CON CULTIVO, TANTO PARA LESIONES SUGESTIVAS (VALOR DE COHEN´S KAPPA, K = 0.52) COMO PARA LESIONES COMPATIBLES (K = 0.44). EN LOS 41 CASOS SE OBTUVO ADN DE NÓDULOS LINFÁTICOS DEL TRACTO RESPIRATORIO. SE INSTRUMENTÓ UN MÉTODO DE PCR SIMPLE DIRIGIDO CONTRA UN SEGMENTO DE LA SECUENCIA QUE CODIFICA PARA LA PROTEÍNA MPB70 Y SE DESARROLLÓ UNA NUEVA TÉCNICA DE PCR ANIDADA. LA PCR ANIDADA DETECTÓ COMO POSITIVOS LOS 21 CASOS CON LESIONES SUGESTIVAS DE TB (100%). AMBOS MÉTODOS DE PCR MOSTRARON BUENA CONCORDANCIA CON HISTOPATOLOGÍA (K = 0.44-0.71), PERO EN EL CASO DEL CULTIVO DE M. BOVIS ÉSTA SÓLO SE OBSERVÓ CON LA PCR ANIDADA (K = 0.52). CONSIDERANDO LAS LESIONES COMPATIBLES (ZN) COMO DIAGNÓSTICO CONFIRMATIVO, TANTO EL CULTIVO COMO LA PCR SIMPLE MOSTRARON 53% DE SENSIBILIDAD Y 88% DE ESPECIFICIDAD, MIENTRAS QUE LA PCR ANIDADA MOSTRÓ 100% DE SENSIBILIDAD Y 77% DE ESPECIFICIDAD. LA PCR ANIDADA PUEDE PERMITIR LA CONFIRMACIÓN DEL DIAGNÓSTICO DE TB EN 24 HORAS.
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